Fluorescencija in situ hibridizacija (FISH) je jedna od nekoliko tehnika koje se koriste za pretraživanje DNA vaših stanica, tražeći prisutnost ili odsutnost specifičnih gena ili dijelova gena.
Mnoge različite vrste raka povezane su s poznatim genetskim abnormalnostima. Genetski, mi ne govorimo samo o nasljeđivanju. Tijekom života, stanice mogu pogriješiti kad se podijele i rastu. Mutacije u DNA koja su povezana s rakom mogu se akumulirati u tim stanicama.
Kako FISH radi? FISH je tehnika koja koristi fluorescentne sonde za otkrivanje specifičnih gena ili dijelova gena (DNA sekvence). Medicinski centar laboratorija i onkolozi koriste FISH za procjenu pacijenata koji imaju rak, a ponekad i za praćenje pacijenta koji je već dijagnosticiran i liječen od raka.
FISH se može obaviti korištenjem različitih vrsta uzoraka ovisno o lokaciji i vrsti karcinoma sumnjivih: Tumorske stanice dobivene iz periferne krvi, iz biopsije koštane srži ili iz biopsije limfnih čvorova i formalin fiksiranog parafinskog tkiva (ovo se odnosi na uzorak tkiva koji se obrađuje u laboratoriju i ugrađen u neku vrstu voska, što ga čini krutim, tako da se može rezati u tanke dijelove i montirati za gledanje pod mikroskopom).
Što slova znače?
"H" u FISH-u se odnosi na hibridizaciju.
U molekularnoj hibridizaciji, označena DNA ili RNA sekvenca se koristi kao sonda – vizualizirati crvenu Lego ciglu, ako to želite. Sonda se koristi za pronalaženje protupješačkog Lego cigle, ili DNA sekvence, u biološkom uzorku. DNK u vašem primjerku nalik je gomilama Lego cigle, a većina cigle u tim gomilama ne odgovara našoj crvenoj sondi.
A sve vaše cigle su uredno organizirane u 23 parova cigli – svaka hrpa je jedan od vaših uparenih homolognih kromosoma, više ili manje. Za razliku od Lego cigle, naša crvena Lego sonda je poput snažnog magneta i pronađe njegovu utakmicu, a da ne treba razbijati gomile.
"F" se odnosi na fluorescenciju. Naša crvena sonda može se izgubiti u hrpe cigle, tako da je obilježena boji fluorescentna boja tako da će sjaj. Kada pronađe svoje podudaranje između 23 parova, fluorescentna oznaka otkriva njegovu lokaciju. Sada možete vidjeti kako istraživači i kliničari mogu koristiti FISH kako bi pomogli identificirati gdje (koja hrpa, ili koji kromosom) određeni gen nalazi se za određenu osobu.
"I" i "S" stoje za
in situ
. To se odnosi na činjenicu da je naša crvena Lego cigla u potrazi za svojom utakmicom
unutar uzorka koji ste dali .Što o specifičnim raka krvi? FISH i ostaliin situ postupci hibridizacije koriste se za dijagnosticiranje raznih kromosomskih abnormalnosti – promjene u genetskom materijalu, promjene u kromosomima, uključujući sljedeće:
Brisanje
– dio kromosoma je otišao Translokacija – dio jedan kromosom odbija i drži se na drugom kromosomu
Inverzija – dio kromosoma se prekida i ponovno unese natrag, ali obrnutim redoslijedom
Umnožavanje – dio kromosoma prisutan je u previše kopija unutar ćelije
Svaka vrsta raka može imati svoj vlastiti skup kromosomskih promjena i relevantnih sondi. FISH ne samo da pomaže prepoznati početne genetske promjene u procesu bolesti kao što je rak, ali se također može koristiti za praćenje odgovora na terapiju i remisiju bolesti. Genetske promjene koje otkriva FISH ponekad nude dodatne informacije o tome kako se rak pojedinca vjerojatno ponaša, na temelju onoga što se u prošlosti uočilo kod ljudi s istom vrstom raka i sličnim genetskim promjenama. Ponekad se FISH upotrebljava nakon što je već postavljena dijagnoza, kako bi se prikupile dodatne informacije koje bi mogle pomoći u predviđanju ishodu pacijenta ili najboljem liječenju.
FISH može identificirati kromosomske abnormalnosti u leukemijama, uključujući kroničnu limfocitnu leukemiju (CLL). Za kroničnu limfocitnu leukemiju / mali limfocitni limfom, FISH omogućuje pacijentima da saznaju svoju prognostičku kategoriju: dobar, srednji ili loš. U akutnoj limfoblastičnoj leukemiji (ALL) genetika leukemijskih stanica može vam reći o razini rizika od raka i pomoći u vođenju terapijskih odluka. FISH ploče su također dostupne za limfom, multiplog mijeloma, proliferativne poremećaje plazme stanica i mijelodisplastični sindrom. U slučaju limfoma stanica plašta, na primjer, postoji
translokacija koja FISH može detektirati zove GH / CCND1 t (11; 14) koji je često povezan s tim limfomom.
Zašto FISH?
Prednost FISH-a jest da se ne mora obavljati na stanicama koje se aktivno dijele. Citogenetski testovi obično traju oko tri tjedna, jer stanice raka moraju rasti u laboratorijskim posudama oko 2 tjedna prije nego što se mogu testirati. Nasuprot tome, rezultati FISH-a obično su dostupni iz laboratorija u roku od nekoliko dana.
